WSI系统，又称虚拟切片，是将整个载玻片整体快速扫描，从而可以在电脑上进行任意的放大和缩小，可以观测到玻璃切片上的任何一个位置，也可以将相应的位置放大到5倍、10倍、20倍、40倍，如同在显微镜上的放大缩小一样。

别名还包括多色免疫组化、多色荧光免疫组化、多标记免疫组化、多靶点病理染色等。此处泛指以免疫组化技术为基础，通过抗原、抗体的特异性结合，实现目标抗原的显色标记。依据使用染料的不同，可以分为明场染料标记（如DAB）或荧光染料标记（如FITC）两种方式。

即通过荧光素标记的DNA探针与样本细胞核内的DNA靶序列杂交，从而获得细胞核内染色体或基因状态的信息

肿瘤与肿瘤微环境密切相关，肿瘤可以通过释放细胞信号分子影响其微环境环境，促进肿瘤的血管生成和诱导免疫耐受，而微环境中的免疫细胞可影响癌细胞增长和发育，TME在不同病人中呈现复杂的多样性，是影响肿瘤免疫治疗效果的重要因素。

空间生物学是一门迅速兴起的科学学科，通过分析肿瘤组织切片的空间结构，从分子水平绘制肿瘤和免疫细胞在肿瘤微环境中的复杂组织形态和相互作用图。能够在肿瘤组织固有的空间背景下检测数十到数千个癌症细胞亚克隆或分子生物标记物。是实体组织细胞表型的“流式细胞仪”。 而PCR、质谱或NGS测序等技术都丧失了单细胞形态本身及周边组织的结构信息。实际应用中，往往通过对组织切片进行多靶点标记染色（即多重免疫组化染色）、成像，随后进行组织的拆分和细胞表型的识别，在此基础上计算不同细胞之间的空间关系，进而进行邻近度分析、细胞关系分析等，从而对细胞如何与其周围环境对话做出推测。其技术是指导肿瘤免疫治疗的基础性技术。

相对于病理医生人工读片时的定性分析而言。通过病理图像分析软件，对病理组织样本图像特征进行量化分析。一般分为组织分割、细胞分割、阳性细胞计数或分级评分等步骤，以及随后对定量结果的统计分析和可视化展示。

使用抗体检测目标，然后使用荧光基团进行可视化。包括免疫组织荧光（IHF：immunohistofluorescence）和免疫细胞荧光（ICF：immunocytofluorescence）。免疫组织荧光（IHF）使用抗体检测组织中的目标，随后使用荧光基团进行可视化；免疫细胞荧光（ICF）使用抗体检测细胞中的靶点，随后使用荧光基团进行可视化。

使用抗体结合抗原的基本方法是相同的。然而，确定抗体位置的方法不同。IHF使用荧光标记的抗体，使用荧光显微镜检测荧光，通常包括使用特定波长的光激发荧光团和检测偏移的、更长波长的发射光。IHC方法通过化学反应，通常产生显色来产生显微镜下可见的信号。

直接免疫荧光使用针对目标的单一抗体。一抗直接带有荧光基团。间接免疫荧光使用两种抗体。一抗不带荧光基团，只是负责结合目标，通过带荧光基团的二抗特异性结合一抗进行检测。